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大肠杆菌基因编辑

发布时间:2023-09-06 09:35浏览次数:

瑾萱生物(Gxene Biotech)从事微生物基因编辑多年,已拥有了完善的基因编辑技术平台,我们的基因编辑技术平台拥有经验丰富的技术人员,高效的实验流程以及完善的实验设备。我们的科学家可根据客户的具体需求进行一对一的方案定制,提供多种微生物的 编辑服务,以满足客户的需求。

大肠杆菌(Escherichia coli),又叫大肠埃希氏菌,是最为常见的一类模式微生物和生物工程领域应用最广泛的宿主菌。在相关基础研究及应用过程中, 往往需要对大肠杆菌的遗传性状进行改造。 其中基因组编辑通过在染色体水平上进行靶基因的敲除、 插入或替换, 可以稳定地实现大肠杆菌的多靶点的遗传性状的改变, 目前已经成为大肠杆菌代谢工程研究最重要的方法之一。

 

 

传统λRed同源重组法

 

大肠杆菌基因敲除的传统方法是利用其自身的Rec A同源重组系统编码的RecA和RecBCD蛋白介导DNA的同源重组.但是以该系统为基础的基因打靶存在较多的缺点:首先,由于RecBCD具有核酸外切酶活性,线性的打靶DNA将被降解,打靶基因必须整合于戴体上才能进行同源重组;其次,打靶片段需要较长的同源臂,往往长达几百个碱基,而且同源重组效率低,往往不能得到所需的重组子。

图1 传统λRed同源重组法

 

CRISPR/Cas9基因编辑技术

 

CRISPR-Cas9基因编辑技术就是通过人工设计的 sgRNA(guide RNA)来识别目的基因组序列,并引导 Cas9 蛋白酶进行有效切割 DNA 双链,形成双链断裂,损伤后修复会造成基因敲除或敲入等,最终达到对基因组DNA 进行修饰的目的。相较于传统的同源重组敲除基因的方法,CRISPR-Cas9基因编辑技术速度更快,无痕,结果更精准,非常便于您开展后续的实验研究。

 

 

 图2 CRISPR/Cas9基因编辑技术

 

服务内容

 

服务内容

周期

基因敲除

客户提供:

*需改造的菌株信息

*敲除的序列信息

5-8周

基因敲入或点突变

客户提供:

*需改造的菌株信息

*敲除的序列信息/突变位点信息

5-8周

 

瑾萱生物科技多年致力于微生物基因组编辑服务,主要可为您提供传统λRed同源重组法和CRISPR/Cas9技术实现高度精确和高效的无疤痕基因组编辑。我司提供的微生物基因编辑系统主要包括大肠杆菌枯草芽孢杆菌沙门氏菌毕赤酵母酿酒酵母白色念珠菌金黄色葡萄球菌铜绿甲假单胞菌乳酸菌等。您也可以根据自己的需求指定其他微生物菌属,具体情况还需与我们专业的技术人员联系

 

 

服务优势

 

--快速的实验周期,节省客户成本

--成熟的实验技术,实现无疤痕基因组编辑

--多种微生物的基因编辑系统,适用于客户的多种项目

--可为新微生物开发 CRISPR 方法提供有力的技术支持

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